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臨床使用常見問題解答

臨床使用常見問題解答

  • 分類:產(chǎn)品知識
  • 作者:
  • 來源:
  • 發(fā)布時間:2021-12-03
  • 訪問量:0

【概要描述】試劑為什么不能從冰箱中拿出后直接使用?
答:試劑溫度過低,在反應(yīng)室內(nèi)易發(fā)生冷凝集,從而影響結(jié)果的準(zhǔn)確性。正確的方法是從冰箱取出試劑后,室溫平衡十分鐘左右。

臨床使用常見問題解答

【概要描述】試劑為什么不能從冰箱中拿出后直接使用?
答:試劑溫度過低,在反應(yīng)室內(nèi)易發(fā)生冷凝集,從而影響結(jié)果的準(zhǔn)確性。正確的方法是從冰箱取出試劑后,室溫平衡十分鐘左右。

  • 分類:產(chǎn)品知識
  • 作者:
  • 來源:
  • 發(fā)布時間:2021-12-03
  • 訪問量:0
詳情
一、試劑為什么不能從冰箱中拿出后直接使用?
答:試劑溫度過低,在反應(yīng)室內(nèi)易發(fā)生冷凝集,從而影響結(jié)果的準(zhǔn)確性。正確的方法是從冰箱取出試劑后,室溫平衡十分鐘左右。
 
二、凝膠卡存放的適宜條件?
答:溫度:18-25度保存; 避免陽光直射。
 
三、為什么凝膠卡做抗人球?qū)嶒灴擅獬礈?
答:因為RBC的密度遠(yuǎn)大于血清中的球蛋白,在給定的離心條件下,當(dāng)離心時,RBC的沉降速率遠(yuǎn)大于球蛋白,故RBC首先和凝膠中的抗人球蛋白反應(yīng),而不受血清中的球蛋白干擾,從而可免除洗滌這一步驟。
 
四、為什么用凝膠卡要先加細(xì)胞后加血清?
答:因為加細(xì)胞的量要比加血清的量大,先加細(xì)胞,可以在反應(yīng)腔內(nèi)形成大而充分的反應(yīng)界面,與后加入的血清反應(yīng)效果良好。
 
五、鐮刀形紅細(xì)胞貧血病人在做血型配血時易出現(xiàn)假陽性,為什么? 
答:正常的紅細(xì)胞有一定的變形性,可以通過小于其直徑的凝膠間隙,而鐮形紅細(xì)胞貧血的病人紅細(xì)胞變形能力降低,剛性增大,不能透過凝膠間隙,故出現(xiàn)假陽性。
 
六、嚴(yán)重感染的病人易出現(xiàn)假陽性,為什么? 
答:病人血清或血漿中的白細(xì)胞過多,堵塞了凝膠間隙,從而影響了紅細(xì)胞的沉降,造成假陽性。
 
七、除第五、第六外微柱凝膠假陽性和假陰性反應(yīng)常見原因
1. 假陽性反應(yīng)可見于:
(1)未完全去除纖維蛋白原的血清標(biāo)本,殘存纖維蛋白原在凝膠中成為纖維蛋白,阻礙紅細(xì)胞沉淀而浮于膠中或膠表面。
(2)被檢標(biāo)本染菌也使紅細(xì)胞浮于膠中或膠表面。
(3)被檢紅細(xì)胞破碎,常見是因為紅細(xì)胞陳舊,此時即使應(yīng)該是陰性結(jié)果,這是因為離心時微柱管離心力方向和該微管軸方向不一致,本應(yīng)為陰性的結(jié)果的沉淀位置偏離,而擬弱陽性反應(yīng)。
(4)離心后紅細(xì)胞沉淀在微柱凝膠管底及近底部一側(cè),而不是在管底尖部。此為離心時微柱管離心力方向和該微管軸向方向不一致,本應(yīng)為陰性結(jié)果的沉淀位置偏離而呈擬弱陽性反應(yīng)。
(5)實驗室溫度低時,因凝膠顆?;顒有詼p少,單個紅細(xì)胞穿過時困難,易出現(xiàn)假陽性結(jié)果。
2. 假陰性反應(yīng)。
(1)抗原或抗體過少、過弱。
(2)抗原、抗體比例不合適,如前帶或后帶的現(xiàn)象。
(3)離心力過大,使弱陽性成為陰性格局。
 
八、溶血反應(yīng)現(xiàn)象有哪些原因及臨床意義
1. 實驗操作者錯誤或?qū)嶒灅?biāo)本有問題
發(fā)生溶血反應(yīng)不一定就是抗原抗體特異性反應(yīng)所致,可能的原因有:
(1)反應(yīng)液是低滲透壓溶液;
(2)受過熱或過冷溫度影響;
(3)紅細(xì)胞或抗體被細(xì)菌等污染;
(4)其他使紅細(xì)胞破壞的物理、化學(xué)因素。
2. 可能是因為紅細(xì)胞抗原抗體溶血性反應(yīng)
(1)紅細(xì)胞抗原與特異性抗體結(jié)合,激活補(bǔ)體,作用于紅細(xì)胞膜,使之破裂,發(fā)生溶血。
(2)紅細(xì)胞抗原與特異性抗體結(jié)合,未激活補(bǔ)體,但因受到血清中其他因子作用而溶血。
3. 溶血的臨床意義
一定不能將溶血標(biāo)本認(rèn)定是陰性反應(yīng),一定要將其記錄為溶血反應(yīng),不要記錄為陽性反應(yīng),更不能記錄為陰性反應(yīng)。而且要高度警惕:
(1)發(fā)生溶血標(biāo)本所相應(yīng)的血液中可能存在陽性的紅細(xì)胞抗原抗體反應(yīng),對患者極有可能有危險,即可能是受供者血型不相容所致,此時抗體應(yīng)明確為臨床有意義抗體。
(2)也極可能是在工作中那個步驟發(fā)生了錯誤。因此,一定不要輸用其標(biāo)本已發(fā)生溶血的血液。首先要取新的一份血液,取其標(biāo)本,應(yīng)用傳統(tǒng)試管血凝法和微柱凝膠方法同時對比檢測,選擇相容的血液進(jìn)行輸血;一定要在短期內(nèi)繼續(xù)查找此次溶血的原因。
 
九、什么是IgG不完全抗體的Coombs試驗?
人 紅細(xì)胞表面抗原與不完全抗體結(jié)合(常是IgG類抗體),即不完全抗體致敏紅細(xì)胞,由于該不完全抗體分子量小或和其兩個Fab段擴(kuò)張角度小,不能使相鄰紅細(xì) 胞橋聯(lián),紅細(xì)胞仍是分散狀況,不出現(xiàn)肉眼可見的紅細(xì)胞凝集現(xiàn)象。在反應(yīng)體系中,加入針對該抗體的抗體,即抗抗體,該抗抗體Fab段結(jié)合紅細(xì)胞上不完全抗體 Fc段,出現(xiàn)肉眼可見的紅細(xì)胞凝集現(xiàn)象。
 
十、什么是Coombs試驗的應(yīng)用
1. 直接抗人球蛋白試驗;
(1)對新生兒溶血病(HDN)胎兒(嬰兒)紅細(xì)胞檢測;
(2)輸血反應(yīng);
(3)其他溶血性疾??;
2. 間接抗人球蛋白試驗;
(1)檢測體內(nèi)不規(guī)則抗體;
① 妊娠婦女;
② 獻(xiàn)血者;
③ 受血者或有過輸血史的人;
(2)交叉配血試驗;
(3)對已發(fā)現(xiàn)抗體鑒定;
(4)對一些血型抗原的檢測,如D弱型,Kell 、Duffy 、Kidd和其他血型檢測。
 
十一、什么是完全抗體和不完全抗體?
在 適當(dāng)?shù)慕橘|(zhì)(液體、凝膠等)中,能夠與相應(yīng)特異性抗原出現(xiàn)肉眼可見的免疫反應(yīng)(凝集反應(yīng)、沉淀反應(yīng)或溶血反應(yīng))的抗體,稱之完全抗體;在適當(dāng)介質(zhì)中,不能 出現(xiàn)肉眼可見的免疫反應(yīng)的抗體被稱之不完全抗體。IgM類抗體一般是完全抗體,IgG類抗體一般是不完全抗體,但I(xiàn)gG類抗體并不都是不完全抗體,一些 IgG抗體與其特異性紅細(xì)胞抗原結(jié)合,也出現(xiàn)肉眼可見的凝血反應(yīng)或溶血反應(yīng)。完全抗體和不完全抗體分類一般指抗體的免疫反應(yīng)性質(zhì),即以能否出現(xiàn)肉眼可見免 疫反應(yīng)而區(qū)分。
 
十二、什么是規(guī)則抗體和不規(guī)則抗體?
人 體內(nèi)產(chǎn)生的抗體一般都是外來的自身體內(nèi)部存在的抗原所免疫,產(chǎn)生的抗體,稱之為規(guī)則抗體。人體內(nèi)抗體的特異性是針對自身體內(nèi)已有的抗原,該類抗體稱之為不 規(guī)則抗體。對ABO血型,A型人只有抗B,B型人只有抗A,O型人有抗A,B,AB型人沒有抗A和抗B,這些抗體為規(guī)則抗體;如果A型人有抗A,B型人有 抗B,AB型人出現(xiàn)抗A或和抗B,血型血清學(xué)確定的ABO血型,如抗原弱表達(dá)的Ax型人,這些抗體為不規(guī)則抗體。D表性陽性人體內(nèi)出現(xiàn)的抗D抗體,抗體如 果經(jīng)研究確定了該抗體是針對該人紅細(xì)胞表面所缺乏的D抗原表位(該D陽性紅細(xì)胞是D抗原表位部分缺失型)則該抗D是規(guī)則抗體。應(yīng)強(qiáng)調(diào),只有在免疫遺傳學(xué), 在抗原分子水平已經(jīng)確定了是D抗原表位部分缺失型所產(chǎn)生的抗D之時,將該抗體,明確為規(guī)則抗體,但是在臨床上發(fā)出D抗原表型陽性人出現(xiàn)抗D在對其詳細(xì)深入 研究之前,首先將其作為不規(guī)則抗體。
規(guī)則抗體和不規(guī)則抗體分類的根據(jù)是免疫遺傳學(xué)基本理論,即抗體產(chǎn)生的一般規(guī)則。
 
十三、什么是意外抗體和非意外抗體?
1. 在 臨床血型血清學(xué)工作中發(fā)現(xiàn)的ABO血型不規(guī)則抗體,D表性陽性人體內(nèi)出現(xiàn)的抗D抗體(不論是否已經(jīng)確定其是D抗原表位不完全型),以及具有獲得型B型紅細(xì) 胞的人檢測出的抗A等,都稱之意外抗體。意外抗體包括了在臨床血型血清學(xué)檢測中遇到的所有異常的"意外"抗體。反之,正常的,規(guī)則抗體均為非意外抗體。
2. 意外抗體和非意外抗體,分類主要是指臨床血型血清學(xué)檢測中遇到的異常、"意外"的抗體或者是正常的規(guī)律性抗體。D陰性人血清中檢出抗D抗體,不將其稱為意外抗體,因?qū)陰性人,應(yīng)預(yù)料到并高度注意血清中可能有抗D抗體。
 
十四、什么是臨床有意義抗體和無意義抗體?
ABO 血型、Rh血型不相容輸血或胎母血型不相容妊娠等情況產(chǎn)生的ABO、Rh血型抗體,能夠引起輸血反應(yīng)或新生兒溶血病,這類抗體都是臨床有意義抗體,凡是在 臨床上能發(fā)生同種異體免疫反應(yīng),如溶血,血細(xì)胞減少等病癥的血型抗體,都是臨床有意義抗體。而對于有些血型系統(tǒng),如P血型,即使是該血型不相容輸血或妊 娠,可能產(chǎn)生P血型同種異體抗體,但并不發(fā)生溶血性反應(yīng)和新生兒溶血病,此類抗體稱之臨床無意義抗體。臨床無意義抗體,指的是一般規(guī)律,在一般情況不產(chǎn)生 同種異體血型免疫反應(yīng),但是個別情況,對少數(shù)病例可能產(chǎn)生病癥,甚至嚴(yán)重的輸血反應(yīng)或新生兒溶血病,如MN血型。故臨床上不能將這些抗體絕對地稱之臨床有 意義抗體或無意義抗體。
 
十五、有關(guān)Rh試驗的其他問題
 
 
 
我們將假陽性反應(yīng)及假陰性反應(yīng)做進(jìn)一步說明。
一、假陽性反應(yīng),情況會導(dǎo)致紅細(xì)胞定型結(jié)果為假陽性??笵為灰色;抗C為粉紅色;抗E為棕色;抗c為暗綠色;抗e為綠色;抗CDE為橘黃色。試 劑中存在意外抗體,針對人群中出現(xiàn)頻率小于1%的抗原的抗體偶爾也會引起假陽性反應(yīng)。這些抗體發(fā)生率低,即使是無輸血也常會有相應(yīng)的抗體,抗體的混合物并 不罕見,可能是除人紅細(xì)胞外的其他抗原刺激產(chǎn)生的。
二、下面情況可導(dǎo)致紅細(xì)胞定型出現(xiàn)假陰性結(jié)果。
(一)誤用錯誤的抗血清或其他一些顏色相近的試劑。
(二)試管中沒有加抗血清。
(三)一種特異性血清不能與抗原的某種變異形式反應(yīng)。例如,抗e血清不一定與黑人中較常見的e抗原變異體反應(yīng)。較少見的還有抗E血清也可能與EW抗原反應(yīng)弱或不反應(yīng)。
(四)抗血清主要含直接抗順式Rh抗原的抗體。用其檢查帶有獨立基因產(chǎn)生的個體抗原的紅細(xì)胞,其結(jié)果是不可靠的。較常見的抗C血清,其與R1或r,產(chǎn)生的抗原的反應(yīng)總比Rz或Ry產(chǎn)生的C抗原反應(yīng)強(qiáng)。
(五)沒有遵循試劑使用說明,而不正確地使用抗血清,例如,血清與紅細(xì)胞的比例不合算,孵育溫度或孵育時間不正確。
(六)離心后看結(jié)果時過度用力振搖試管,會使紅細(xì)胞的弱凝集消失。
(七)抗血清中免疫球蛋白會因污染、保存不當(dāng)或過期而變質(zhì)。尤其是化學(xué)修飾的IgG抗體容易被某些蛋白水解酶破壞,而細(xì)菌會產(chǎn)生此酶。
人體紅細(xì)胞上還可檢出300多個其他抗原。其中一些存在于其他組織內(nèi)。系統(tǒng)抗原存在于除成熟紅細(xì)胞以外的大多數(shù)人體細(xì)胞或血小板上。臨床受血者產(chǎn)生抗體。
幾乎所有人的特定細(xì)胞系都有的抗原稱為高頻或“公共”抗原,其他一些稱為“私有”抗原。每個已知抗原都是檢查血清中特異抗體時發(fā)現(xiàn)的。供閱讀者參考
—-江陰力博醫(yī)藥生物技術(shù)研究所—
2015.03.25
 

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