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產(chǎn)品知識

臨床使用常見問題解答

分類：產(chǎn)品知識
作者：
來源：
發(fā)布時間：2021-12-03
訪問量：0

【概要描述】試劑為什么不能從冰箱中拿出后直接使用?
答：試劑溫度過低，在反應(yīng)室內(nèi)易發(fā)生冷凝集，從而影響結(jié)果的準(zhǔn)確性。正確的方法是從冰箱取出試劑后，室溫平衡十分鐘左右。

臨床使用常見問題解答

分類：產(chǎn)品知識
作者：
來源：
發(fā)布時間：2021-12-03
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詳情

一、試劑為什么不能從冰箱中拿出后直接使用?

答：試劑溫度過低，在反應(yīng)室內(nèi)易發(fā)生冷凝集，從而影響結(jié)果的準(zhǔn)確性。正確的方法是從冰箱取出試劑后，室溫平衡十分鐘左右。

二、凝膠卡存放的適宜條件？

答：溫度：18-25度保存；避免陽光直射。

三、為什么凝膠卡做抗人球?qū)嶒灴擅獬礈?

答：因為RBC的密度遠(yuǎn)大于血清中的球蛋白，在給定的離心條件下，當(dāng)離心時，RBC的沉降速率遠(yuǎn)大于球蛋白，故RBC首先和凝膠中的抗人球蛋白反應(yīng)，而不受血清中的球蛋白干擾，從而可免除洗滌這一步驟。

四、為什么用凝膠卡要先加細(xì)胞后加血清?

答：因為加細(xì)胞的量要比加血清的量大，先加細(xì)胞，可以在反應(yīng)腔內(nèi)形成大而充分的反應(yīng)界面，與后加入的血清反應(yīng)效果良好。

五、鐮刀形紅細(xì)胞貧血病人在做血型配血時易出現(xiàn)假陽性，為什么？

答：正常的紅細(xì)胞有一定的變形性，可以通過小于其直徑的凝膠間隙，而鐮形紅細(xì)胞貧血的病人紅細(xì)胞變形能力降低，剛性增大，不能透過凝膠間隙，故出現(xiàn)假陽性。

六、嚴(yán)重感染的病人易出現(xiàn)假陽性，為什么？

答：病人血清或血漿中的白細(xì)胞過多，堵塞了凝膠間隙，從而影響了紅細(xì)胞的沉降，造成假陽性。

七、除第五、第六外微柱凝膠假陽性和假陰性反應(yīng)常見原因

1. 假陽性反應(yīng)可見于：

（1）未完全去除纖維蛋白原的血清標(biāo)本，殘存纖維蛋白原在凝膠中成為纖維蛋白，阻礙紅細(xì)胞沉淀而浮于膠中或膠表面。

（2）被檢標(biāo)本染菌也使紅細(xì)胞浮于膠中或膠表面。

（3）被檢紅細(xì)胞破碎，常見是因為紅細(xì)胞陳舊，此時即使應(yīng)該是陰性結(jié)果，這是因為離心時微柱管離心力方向和該微管軸方向不一致，本應(yīng)為陰性的結(jié)果的沉淀位置偏離，而擬弱陽性反應(yīng)。

（4）離心后紅細(xì)胞沉淀在微柱凝膠管底及近底部一側(cè)，而不是在管底尖部。此為離心時微柱管離心力方向和該微管軸向方向不一致，本應(yīng)為陰性結(jié)果的沉淀位置偏離而呈擬弱陽性反應(yīng)。

（5）實驗室溫度低時，因凝膠顆?；顒有詼p少，單個紅細(xì)胞穿過時困難，易出現(xiàn)假陽性結(jié)果。

2. 假陰性反應(yīng)。

（1）抗原或抗體過少、過弱。

（2）抗原、抗體比例不合適，如前帶或后帶的現(xiàn)象。

（3）離心力過大，使弱陽性成為陰性格局。

八、溶血反應(yīng)現(xiàn)象有哪些原因及臨床意義

1. 實驗操作者錯誤或?qū)嶒灅?biāo)本有問題

發(fā)生溶血反應(yīng)不一定就是抗原抗體特異性反應(yīng)所致，可能的原因有：

（1）反應(yīng)液是低滲透壓溶液；

（2）受過熱或過冷溫度影響；

（3）紅細(xì)胞或抗體被細(xì)菌等污染；

（4）其他使紅細(xì)胞破壞的物理、化學(xué)因素。

2. 可能是因為紅細(xì)胞抗原抗體溶血性反應(yīng)

（1）紅細(xì)胞抗原與特異性抗體結(jié)合，激活補(bǔ)體，作用于紅細(xì)胞膜，使之破裂，發(fā)生溶血。

（2）紅細(xì)胞抗原與特異性抗體結(jié)合，未激活補(bǔ)體，但因受到血清中其他因子作用而溶血。

3. 溶血的臨床意義

一定不能將溶血標(biāo)本認(rèn)定是陰性反應(yīng)，一定要將其記錄為溶血反應(yīng)，不要記錄為陽性反應(yīng)，更不能記錄為陰性反應(yīng)。而且要高度警惕：

（1）發(fā)生溶血標(biāo)本所相應(yīng)的血液中可能存在陽性的紅細(xì)胞抗原抗體反應(yīng)，對患者極有可能有危險，即可能是受供者血型不相容所致，此時抗體應(yīng)明確為臨床有意義抗體。

（2）也極可能是在工作中那個步驟發(fā)生了錯誤。因此，一定不要輸用其標(biāo)本已發(fā)生溶血的血液。首先要取新的一份血液，取其標(biāo)本，應(yīng)用傳統(tǒng)試管血凝法和微柱凝膠方法同時對比檢測，選擇相容的血液進(jìn)行輸血；一定要在短期內(nèi)繼續(xù)查找此次溶血的原因。

九、什么是IgG不完全抗體的Coombs試驗？

人紅細(xì)胞表面抗原與不完全抗體結(jié)合（常是IgG類抗體），即不完全抗體致敏紅細(xì)胞，由于該不完全抗體分子量小或和其兩個Fab段擴(kuò)張角度小，不能使相鄰紅細(xì) 胞橋聯(lián)，紅細(xì)胞仍是分散狀況，不出現(xiàn)肉眼可見的紅細(xì)胞凝集現(xiàn)象。在反應(yīng)體系中，加入針對該抗體的抗體，即抗抗體，該抗抗體Fab段結(jié)合紅細(xì)胞上不完全抗體 Fc段，出現(xiàn)肉眼可見的紅細(xì)胞凝集現(xiàn)象。

十、什么是Coombs試驗的應(yīng)用

1. 直接抗人球蛋白試驗；

（1）對新生兒溶血病（HDN）胎兒（嬰兒）紅細(xì)胞檢測；

（2）輸血反應(yīng)；

（3）其他溶血性疾??；

2. 間接抗人球蛋白試驗；

（1）檢測體內(nèi)不規(guī)則抗體；

① 妊娠婦女；

② 獻(xiàn)血者；

③ 受血者或有過輸血史的人；

（2）交叉配血試驗；

（3）對已發(fā)現(xiàn)抗體鑒定；

（4）對一些血型抗原的檢測，如D弱型，Kell 、Duffy 、Kidd和其他血型檢測。

十一、什么是完全抗體和不完全抗體？

在適當(dāng)?shù)慕橘|(zhì)（液體、凝膠等）中，能夠與相應(yīng)特異性抗原出現(xiàn)肉眼可見的免疫反應(yīng)（凝集反應(yīng)、沉淀反應(yīng)或溶血反應(yīng)）的抗體，稱之完全抗體；在適當(dāng)介質(zhì)中，不能出現(xiàn)肉眼可見的免疫反應(yīng)的抗體被稱之不完全抗體。IgM類抗體一般是完全抗體，IgG類抗體一般是不完全抗體，但I(xiàn)gG類抗體并不都是不完全抗體，一些 IgG抗體與其特異性紅細(xì)胞抗原結(jié)合，也出現(xiàn)肉眼可見的凝血反應(yīng)或溶血反應(yīng)。完全抗體和不完全抗體分類一般指抗體的免疫反應(yīng)性質(zhì)，即以能否出現(xiàn)肉眼可見免疫反應(yīng)而區(qū)分。

十二、什么是規(guī)則抗體和不規(guī)則抗體？

人體內(nèi)產(chǎn)生的抗體一般都是外來的自身體內(nèi)部存在的抗原所免疫，產(chǎn)生的抗體，稱之為規(guī)則抗體。人體內(nèi)抗體的特異性是針對自身體內(nèi)已有的抗原，該類抗體稱之為不規(guī)則抗體。對ABO血型，A型人只有抗B，B型人只有抗A，O型人有抗A，B，AB型人沒有抗A和抗B，這些抗體為規(guī)則抗體；如果A型人有抗A，B型人有抗B，AB型人出現(xiàn)抗A或和抗B，血型血清學(xué)確定的ABO血型，如抗原弱表達(dá)的Ax型人，這些抗體為不規(guī)則抗體。D表性陽性人體內(nèi)出現(xiàn)的抗D抗體，抗體如果經(jīng)研究確定了該抗體是針對該人紅細(xì)胞表面所缺乏的D抗原表位（該D陽性紅細(xì)胞是D抗原表位部分缺失型）則該抗D是規(guī)則抗體。應(yīng)強(qiáng)調(diào)，只有在免疫遺傳學(xué)，在抗原分子水平已經(jīng)確定了是D抗原表位部分缺失型所產(chǎn)生的抗D之時，將該抗體，明確為規(guī)則抗體，但是在臨床上發(fā)出D抗原表型陽性人出現(xiàn)抗D在對其詳細(xì)深入研究之前，首先將其作為不規(guī)則抗體。

規(guī)則抗體和不規(guī)則抗體分類的根據(jù)是免疫遺傳學(xué)基本理論，即抗體產(chǎn)生的一般規(guī)則。

十三、什么是意外抗體和非意外抗體？

1. 在臨床血型血清學(xué)工作中發(fā)現(xiàn)的ABO血型不規(guī)則抗體，D表性陽性人體內(nèi)出現(xiàn)的抗D抗體（不論是否已經(jīng)確定其是D抗原表位不完全型），以及具有獲得型B型紅細(xì) 胞的人檢測出的抗A等，都稱之意外抗體。意外抗體包括了在臨床血型血清學(xué)檢測中遇到的所有異常的"意外"抗體。反之，正常的，規(guī)則抗體均為非意外抗體。

2. 意外抗體和非意外抗體，分類主要是指臨床血型血清學(xué)檢測中遇到的異常、"意外"的抗體或者是正常的規(guī)律性抗體。D陰性人血清中檢出抗D抗體，不將其稱為意外抗體，因?qū)陰性人，應(yīng)預(yù)料到并高度注意血清中可能有抗D抗體。

十四、什么是臨床有意義抗體和無意義抗體？

ABO 血型、Rh血型不相容輸血或胎母血型不相容妊娠等情況產(chǎn)生的ABO、Rh血型抗體，能夠引起輸血反應(yīng)或新生兒溶血病，這類抗體都是臨床有意義抗體，凡是在臨床上能發(fā)生同種異體免疫反應(yīng)，如溶血，血細(xì)胞減少等病癥的血型抗體，都是臨床有意義抗體。而對于有些血型系統(tǒng)，如P血型，即使是該血型不相容輸血或妊娠，可能產(chǎn)生P血型同種異體抗體，但并不發(fā)生溶血性反應(yīng)和新生兒溶血病，此類抗體稱之臨床無意義抗體。臨床無意義抗體，指的是一般規(guī)律，在一般情況不產(chǎn)生同種異體血型免疫反應(yīng)，但是個別情況，對少數(shù)病例可能產(chǎn)生病癥，甚至嚴(yán)重的輸血反應(yīng)或新生兒溶血病，如MN血型。故臨床上不能將這些抗體絕對地稱之臨床有意義抗體或無意義抗體。

十五、有關(guān)Rh試驗的其他問題

我們將假陽性反應(yīng)及假陰性反應(yīng)做進(jìn)一步說明。

一、假陽性反應(yīng)，情況會導(dǎo)致紅細(xì)胞定型結(jié)果為假陽性?？笵為灰色；抗C為粉紅色；抗E為棕色；抗c為暗綠色；抗e為綠色；抗CDE為橘黃色。試劑中存在意外抗體，針對人群中出現(xiàn)頻率小于1%的抗原的抗體偶爾也會引起假陽性反應(yīng)。這些抗體發(fā)生率低，即使是無輸血也常會有相應(yīng)的抗體，抗體的混合物并不罕見，可能是除人紅細(xì)胞外的其他抗原刺激產(chǎn)生的。

二、下面情況可導(dǎo)致紅細(xì)胞定型出現(xiàn)假陰性結(jié)果。

（一）誤用錯誤的抗血清或其他一些顏色相近的試劑。

（二）試管中沒有加抗血清。

（三）一種特異性血清不能與抗原的某種變異形式反應(yīng)。例如，抗e血清不一定與黑人中較常見的e抗原變異體反應(yīng)。較少見的還有抗E血清也可能與EW抗原反應(yīng)弱或不反應(yīng)。

（四）抗血清主要含直接抗順式Rh抗原的抗體。用其檢查帶有獨立基因產(chǎn)生的個體抗原的紅細(xì)胞，其結(jié)果是不可靠的。較常見的抗C血清，其與R1或r，產(chǎn)生的抗原的反應(yīng)總比Rz或Ry產(chǎn)生的C抗原反應(yīng)強(qiáng)。

（五）沒有遵循試劑使用說明，而不正確地使用抗血清，例如，血清與紅細(xì)胞的比例不合算，孵育溫度或孵育時間不正確。

（六）離心后看結(jié)果時過度用力振搖試管，會使紅細(xì)胞的弱凝集消失。

（七）抗血清中免疫球蛋白會因污染、保存不當(dāng)或過期而變質(zhì)。尤其是化學(xué)修飾的IgG抗體容易被某些蛋白水解酶破壞，而細(xì)菌會產(chǎn)生此酶。

人體紅細(xì)胞上還可檢出300多個其他抗原。其中一些存在于其他組織內(nèi)。系統(tǒng)抗原存在于除成熟紅細(xì)胞以外的大多數(shù)人體細(xì)胞或血小板上。臨床受血者產(chǎn)生抗體。

幾乎所有人的特定細(xì)胞系都有的抗原稱為高頻或“公共”抗原，其他一些稱為“私有”抗原。每個已知抗原都是檢查血清中特異抗體時發(fā)現(xiàn)的。供閱讀者參考

—-江陰力博醫(yī)藥生物技術(shù)研究所—

2015.03.25